免疫缺陷檢查方法(免疫學的檢測方法)
1.免疫學的檢測方法有哪些
免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫。
體液免疫：
所謂體液免疫，即以B細胞產(chǎn)生抗體來達到保護目的的免疫機制。負責體液免疫的細胞是B細胞。體液免疫的抗原多為相對分子質(zhì)量在10,000以上的蛋白質(zhì)和多糖大分子，病毒顆粒和細菌表面都帶有不同的抗原，所以都能引起體液免疫。
臨床上一個反復發(fā)作的化膿感染，常使醫(yī)生想到患者是否有免疫缺陷病，一般原發(fā)免疫缺陷發(fā)病年齡很小，而繼發(fā)免疫缺陷病人多在30歲以上。絕大多數(shù)免疫缺陷病人多表現(xiàn)為體液和細胞免疫同時受損，所以應全面檢查這兩方面的功能。遺憾的是，目前應用的檢測方法的局限性，其結果常難以得出明確結論。
細胞免疫：
T細胞受到抗原刺激后，增殖、分化、轉化為致敏T細胞（也叫效應T細胞），當相同抗原再次進入機體的細胞中時，致敏T細胞（效應T細胞）對抗原的直接殺傷作用及致敏T細胞所釋放的細胞因子的協(xié)同殺傷作用，統(tǒng)稱為細胞免疫。
在抗感染免疫中，細胞免疫主要參與對胞內(nèi)寄生的病原微生物的免疫應答及對腫瘤細胞的免疫應答，參與遲發(fā)型變態(tài)反應和自身免疫病的形成，參與移植排斥反應及對體液免疫的調(diào)節(jié)。也可以說，在抗感染免疫中，細胞免疫既是抗感染免疫的主要力量，參與免疫防護；又是導致免疫病理的重要因素。
2.免疫診斷方法有哪些
應用免疫學的理論、技術和方法診斷各種疾病和測定免疫狀態(tài)。
在醫(yī)學上，它是確定疾病的病因和病變部位，或是確定機體免疫狀態(tài)是否正常的重要方法。此外，還應用于法醫(yī)學的血跡鑒定、生物化學的血清成分鑒定和物種進化關系的研究等。
可在體內(nèi)和體外進行。從免疫學的角度免疫診斷可應用于：（1）檢查免疫器官和功能發(fā)生改變的疾?。喝缑庖呷毕莶?、自身免疫病。
（2）由免疫機制引起的疾?。喝巛斞磻⒁浦才懦夥磻?。（3）一些內(nèi)分泌性的疾?。簭呐R床學的角度來說，免疫診斷可應用于檢查傳染性疾病、免疫性疾病、腫瘤和其他臨床各科疾病。
就所檢測的反應物免疫診斷大致可以分為兩類，即：（1）免疫血清學診斷：檢測病人血清或組織內(nèi)有無特異性抗體或特異性抗原。（2）免疫細胞學診斷：測定病人細胞免疫力的有無和強弱。
免疫診斷須體現(xiàn)3項要求：（1）特異性強，盡量不出現(xiàn)交叉反應，不出現(xiàn)假陽性，以保證診斷的準確性。（2）靈敏度高，能測出微量反應物質(zhì)和輕微的異常變化，有利于早期診斷和排除可疑病例。
（3）簡便、快速、安全。
3.免疫缺陷病需要檢查哪些
對所有免疫缺陷病例，必須選作一些實驗室檢查以確立診斷；而在作相應治療之前，通常還須作一些先進試驗對疾病作進一步分類。
一般來說，多數(shù)機構和醫(yī)院能作篩查試驗，多數(shù)大醫(yī)院能作先進試驗，特殊試驗則只有一些實驗室或配備高水平免疫學實驗室的醫(yī)院才能進行。 當懷疑免疫缺陷時，建議進行實驗室篩查試驗，包括全部血細胞計數(shù)及分類計數(shù)和血小板計數(shù)；測定IgG,IgM和IgA濃度；抗體功能測定；感染的臨床和實驗室判斷。
血細胞計數(shù)可發(fā)現(xiàn)貧血，血小板減少，中性粒細胞減少或白細胞增多。應計數(shù)淋巴細胞總數(shù)，如有淋巴細胞減少（免疫球蛋白濃度測定也屬于最先篩查的項目之一，但IgD和IgE濃度最初不測。
對于免疫球蛋白的解釋需謹慎從事，因為有顯著的年齡性差異；以成人的標準，所有2~6個月的嬰兒均有低γ球蛋白血癥。因此免疫球蛋白濃度必須與同年齡對照組的正常濃度相比較。
一般免疫球蛋白濃度在同年齡2SD（標準差）范圍內(nèi)為正常?？偯庖咔虻鞍诐舛龋↖gG+IgM+IgA）>600mg/dl，或IgG>400mg/dl同時抗體功能試驗正常者，可排除抗體缺陷。
總免疫球蛋白濃度抗體篩查試驗也被推薦用于初篩。用同種凝集素滴度（抗A和/或抗B）估計IgM抗體功能。
除若所有這些篩查試驗均正常，則免疫缺陷（特別是抗體缺陷）可排除。但若證實有慢性感染，病史毫無疑問或篩查試驗陽性，則必須進一步作高級試驗檢查。
B細胞（抗體）缺陷的試驗只要總免疫球蛋白很低（若總免疫球蛋白較低，可用熒光抗B細胞特異抗體（如CD19,CD20）經(jīng)流式細胞儀來計算B細胞。 正常外周血中淋巴細胞的10%~20%為膜表面免疫球蛋白陽性細胞（B細胞）。
其次，進行血清IgG亞類，IgD和IgE濃度測定。IgG1亞類濃度（與IgG相似）與年齡明顯有關，通常在2歲后，IgG1某些情況需作其他B細胞缺陷的試驗（表147-5）。
在淋巴結病時或者為了除外惡性腫瘤或感染時，可作淋巴結活檢（有時需先免疫鄰近的肢體）。IgG濃度正?；蚪咏６锌贵w功能缺陷時，需作IgG亞類分析。
可能存在4個亞類中某一亞類的選擇性缺陷。如懷疑有IgG分解加速或經(jīng)皮膚或胃腸道丟失時，則作IgG壽命檢查；如病人IgG濃度低下，可靜脈給予大劑量免疫球蛋白，然后每日測定IgG濃度以確定其半衰期。
若有嚴重感染，可測分泌物（淚液或唾液）中的免疫球蛋白濃度。還可體外檢測IgG合成以及對特異抗原如噬菌體或鑰孔血藍蛋白的抗體反應來確定抗體合成阻斷的確切部位。
在一些遺傳缺陷的疾病，經(jīng)用特殊的實驗室試驗能發(fā)現(xiàn)突變的基因或突變的基因產(chǎn)物（如在X連鎖無γ球蛋白血癥所證實的Bruton酪氨酸激酶基因）T細胞缺陷的試驗持久而極度嚴重的淋巴細胞減少提示T細胞缺陷。 然而淋巴細胞減少并不常見。
胸部X線檢查是篩查嬰兒T細胞缺陷的有用方法。對新生兒特別是在感染或其他能使胸腺變小的應激狀況發(fā)作前作X線檢查，如看不到胸腺影像，提示有T細胞缺陷。
遲發(fā)型皮膚超敏反應試驗對2歲以上兒童是有價值的篩查T細胞缺陷的試驗?？捎靡韵碌目乖毫餍行匀傺卓乖?，念珠菌抗原（1:100），液體破傷風類毒素（1:10）和毛癬菌抗原。
幾乎所有成人以及大多數(shù)免疫嬰兒和兒童會對其中一種或幾種抗原發(fā)生反應，于48小時出現(xiàn)直徑>5mm的紅斑和硬結。存在一個或一個以上陽性遲發(fā)型皮膚試驗通常表明T細胞系統(tǒng)未受損。
診斷細胞免疫最有價值的先進試驗是T細胞和T細胞亞群（輔助/誘導細胞和抑制/細胞毒細胞）的計數(shù)。 通常采用T細胞特異性的鼠單克隆抗體經(jīng)流式細胞儀作檢測。
應用全T細胞抗體（抗CD3，抗CD2）檢測總T細胞，抗CD4抗體檢測T輔助/誘導細胞，抗CD8抗體檢測T抑制/細胞毒細胞（這些試驗已替代羊紅細胞花結法計數(shù)T細胞）。當輔助T細胞（CD4）計數(shù)1。
0。此比值倒置也提示T細胞免疫缺陷（在艾滋病CD4/CD8比值降低表示免疫系統(tǒng)進行性受損）。
單克隆抗體也能有效地檢測激活的細胞（CD25），自然殺傷細胞（CD16和CD56）和不成熟的T細胞胸腺細胞）抗原（CD1）。測量病人淋巴細胞增殖和增大（轉化）能力的另一種有效的先進試驗是將有絲分裂原（如植物血凝素，刀豆素A），照射過的同種白細胞（用于混和白細胞反應）或病人過去接觸過的抗原，與淋巴細胞共同培養(yǎng)。
在這些刺激之下，正常淋巴細胞急速分裂，這可用形態(tài)學方法或將放射性胸腺嘧啶摻入分裂細胞的方法予以測定。增殖程度通常用指數(shù)表示---受刺激細胞的每分鐘計數(shù)（CPM）與等量未受刺激細胞的每分鐘計數(shù)的比值。
T細胞缺陷病人存在與免疫受損程度一致的增殖應答低下甚至消失的現(xiàn)象。 對有絲分裂原（能激活所有細胞）的增殖反應（刺激指數(shù)50~100）明顯地高于對抗原或同種細胞的反應（刺激指數(shù)3~30）。
還可進行特殊試驗測定在有絲分裂原或抗原刺激后淋巴因子的生成。淋巴因子有30多種，但通常測定γ-干擾素（IFN-γ）和白介素-2(IL-2)，白介素-4(IL-4)和α-腫瘤壞死因子。
部分病人有相應的增殖反應，但淋巴因子生成低下。另一組特殊試驗可測定細胞毒功能。
使用不同的腫瘤細胞或病毒感染的靶細胞測定不同類型的細胞毒（自然殺傷細胞，抗體依賴性細胞毒或細胞。
