科學(xué)的分離方法特點(物質(zhì)的分離方法有很多種,分別是什么,有什么特點)
1.物質(zhì)的分離方法有很多種,分別是什么,有什么特點
1.結(jié)晶和重結(jié)晶：利用物質(zhì)在溶液中溶解度隨溫度變化較大，如NaCl,KNO3。
2.蒸餾冷卻法：在沸點上差值大。乙醇中（水）：加入新制的CaO吸收大部分水再蒸餾。
3.過濾法：溶與不溶。
4.升華法：SiO2(I2)。
5.萃取法：如用CCl4來萃取I2水中的I2。
6.溶解法：Fe粉（A1粉）：溶解在過量的NaOH溶液里過濾分離。
7.增加法：把雜質(zhì)轉(zhuǎn)化成所需要的物質(zhì)：CO2(CO)：通過熱的CuO;CO2(SO2)：通過NaHCO3溶液。
8.吸收法：用做除去混合氣體中的氣體雜質(zhì)，氣體雜質(zhì)必須被藥品吸收：N2(O2)：將混合氣體通過銅網(wǎng)吸收O2。
9.轉(zhuǎn)化法：兩種物質(zhì)難以直接分離，加藥品變得容易分離，然后再還原回去：Al(OH)3,Fe(OH)3：先加NaOH溶液把Al(OH)3溶解，過濾，除去Fe(OH)3，再加酸讓NaAlO2轉(zhuǎn)化成A1(OH)3
2.化學(xué)分離法的原理,及特點,應(yīng)用范圍是什么
萃取：適用于一種溶質(zhì)在兩種互不相溶的溶劑中的溶解度相差很大的情況，如果想把這種溶質(zhì)從溶解度較小的溶劑中提取出來，就選擇萃取的方法，如四氯化碳和水互不相溶，且四氯化碳比水更容易溶解碘，于是就可以用分液漏斗把碘單質(zhì)從飽和碘水中萃取出來，溶解到四氯化碳里，再通過蒸餾把碘和四氯化碳分離開來。
其實“萃取”和“分液”經(jīng)常合在一起用，不然的話沒法把溶質(zhì)分離出來。需要的情況下，還和“蒸餾”合用，就像上述的情況，要將溶質(zhì)和溶劑徹底分離。
分液：適用于分離兩種互不相溶，且密度相差較大的液體。如水和植物油的混合物，靜置后會上下分層，水在下層，植物油在上層。這時就可以用分液漏斗，打開活塞至下層的水恰好流盡，用燒杯承接；再打開玻璃塞讓植物油從上口倒出。
分餾：適用于分離沸點相近的液體混合物，如石油就是通過分餾的方法得到各組分，它們都是重要的化工產(chǎn)品：汽油、柴油、酒精等等。
蒸餾：適用于分離沸點相差較大的液體混合物，利用各組分的沸點不同，按沸點由低到高的順序分離出來?；虺ヒ讚]發(fā)、難揮發(fā)或不揮發(fā)的雜質(zhì)。如用蒸餾的方法減少自來水的Cl-雜質(zhì)。或把溶液中的溶劑分離出來，如食鹽水通過蒸餾得到較為純凈的蒸餾水。
蒸發(fā)：適用于分離溶液中的易揮發(fā)溶劑和溶質(zhì)，和我說的“蒸餾”的第二種情況差不多，但如果是要得到純凈的食鹽而不是水的話，一般采用蒸發(fā)的方法而不是蒸餾。還有就是我所說的“萃取”和“蒸發(fā)”合用的方法。
總之，化學(xué)分離方法是多種多樣的，要根據(jù)情況選擇合適的方法，有些方法則是相通的，要本著科學(xué)性、安全性和簡潔性的原則選擇方法。
3.科學(xué)方法的特點
科學(xué)方法是人類所有認識方法中比較高級、比較復(fù)雜的一種方法。它具有以下特點：
(1)鮮明的主體性，科學(xué)方法體現(xiàn)了科學(xué)認識主體的主動性、創(chuàng)造性以及具有明顯的目的性；
(2)充分的合乎規(guī)律性，是以合乎理論規(guī)律為主體的科學(xué)知識程序化；
(3)高度的保真性，是以觀察和實驗以及他們與數(shù)學(xué)方法的有機結(jié)合對研究對象進行量的考察，保證所獲得的實驗事實的客觀性和可靠性。
4.蛋白質(zhì)分離方法有哪些,它們的特點各是什么
1.根據(jù)分子大小不同進行分離純化 蛋白質(zhì)是一種大分子物質(zhì)，并且不同蛋白質(zhì)的分子大小不同，因此可以利用一些較簡單的方法使蛋白 質(zhì)和小分子物質(zhì)分開，并使蛋白質(zhì)混合物也得到分離。
根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小不同進行分離的方法主要有透析、超濾、離心和凝膠過濾等。透析和超濾是分離蛋白質(zhì)時常用的方法。
透析是將待分離的混合物放入半透膜制成的透析袋中，再浸入透析液進行分離。超濾是利用離心力或壓力強行使水和其它小分子通過半透膜，而蛋白質(zhì)被截留在半透膜上的過程。
這兩種方法都可以將蛋白質(zhì)大分子與以無機鹽為主的小分子分開。它們經(jīng)常和鹽析、鹽溶方法聯(lián)合使用，在進行鹽析或鹽溶后可以利用這兩種方法除去引入的無機鹽。
由于超濾過程中，濾膜表面容易被吸附的蛋白質(zhì)堵塞，以致超濾速度減慢，截流物質(zhì)的分子量也越來越小。所以在使用超濾方法時要選擇合適的濾膜，也可以選擇切向流過濾得到更理想的效果 離心也是經(jīng)常和其它方法聯(lián)合使用的一種分離蛋白質(zhì)的方法。
當?shù)鞍踪|(zhì)和雜質(zhì)的溶解度不同時可以利用離心的方法將它們分開。例如，在從大米渣中提取蛋白質(zhì)的實驗中，加入纖維素酶和α-淀粉酶進行預(yù)處理后，再用離心的方法將有用物質(zhì)與分解掉的雜質(zhì)進行初步分離[3]。
使蛋白質(zhì)在具有密度梯度的介質(zhì)中離心的方法稱為密度梯度（區(qū)帶）離心。常用的密度梯度有蔗糖梯度、聚蔗糖梯度和其它合成材料的密度梯度。
可以根據(jù)所需密度和滲透壓的范圍選擇合適的密度梯度。密度梯度離心曾用于純化蘇云金芽孢桿菌伴孢晶體蛋白，得到的產(chǎn)品純度高但產(chǎn)量偏低。
蔣辰等[6]通過比較不同密度梯度介質(zhì)的分離效果，利用溴化鈉密度梯度得到了高純度的蘇云金芽孢桿菌伴孢晶體蛋白。凝膠過濾也稱凝膠滲透層析，是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小不同分離蛋白質(zhì)最有效的方法之一。
凝膠過濾的原理是當不同蛋白質(zhì)流經(jīng)凝膠層析柱時，比凝膠珠孔徑大的分子不能進入珠內(nèi)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，而被排阻在凝膠珠之外，隨著溶劑在凝膠珠之間的空隙向下運動并最先流出柱外；反之，比凝膠珠孔徑小的分子后流出柱外。目前常用的凝膠有交聯(lián)葡聚糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠和瓊脂糖凝膠等。
在甘露糖蛋白提純的過程中使用凝膠過濾方法可以得到很好的效果，純度鑒定證明產(chǎn)品為分子量約為32 kDa、成分是多糖∶蛋白質(zhì)（88∶12）、多糖為甘露糖的單一均勻糖蛋白[1]。凝膠過濾在抗凝血蛋白的提取過程中也被用來除去大多數(shù)雜蛋白及小分子的雜質(zhì)[7]。
2.根據(jù)溶解度不同進行分離純化 影響蛋白質(zhì)溶解度的外部條件有很多，比如溶液的pH值、離子強度、介電常數(shù)和溫度等。但在同一條件下，不同的蛋白質(zhì)因其分子結(jié)構(gòu)的不同而有不同的溶解度，根據(jù)蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的特點，適當?shù)馗淖兺獠織l件，就可以選擇性地控制蛋白質(zhì)混合物中某一成分的溶解度，達到分離純化蛋白質(zhì)的目的。
常用的方法有等電點沉淀和pH值調(diào)節(jié)、蛋白質(zhì)的鹽溶和鹽析、有機溶劑法、雙水相萃取法、反膠團萃取法等。等電點沉淀和pH值調(diào)節(jié)是最常用的方法。
每種蛋白質(zhì)都有自己的等電點，而且在等電點時溶解度最 低；相反，有些蛋白質(zhì)在一定pH值時很容易溶解。因而可以通過調(diào)節(jié)溶液的pH值來分離純化蛋白質(zhì)。
王洪新等[8]研究茶葉蛋白質(zhì)提取過程發(fā)現(xiàn)，pH值為時茶葉蛋白提取效果最好，提取率達到36·8%，初步純化得率為91·0%。李殿寶[9]在從葵花脫脂粕中提取蛋白質(zhì)時將蛋白溶液的pH值調(diào)到3~4，使目標蛋白于等電點沉淀出來。
等電點沉淀法還應(yīng)用于葡萄籽中蛋白質(zhì)的提取。李鳳英等[10]測得葡萄籽蛋白質(zhì)的等電點為3·8。
他們利用堿溶法提取葡萄籽蛋白質(zhì)，得到了最佳的提取工藝為：以1*10-5mol·L-1的NaOH溶液，按1∶5的料液比，在40℃攪拌40 min，葡萄籽蛋白質(zhì)提取率達73·78%。另外還可以利用堿法提取大米蛋白，其持水性、吸油性和起泡性等均優(yōu)于酶法提取[11]。
利用酸法提取得到的鰱魚魚肉蛋白質(zhì)無腥味、色澤潔白，蛋白質(zhì)產(chǎn)率高達90%[12]。 蛋白質(zhì)的鹽溶和鹽析是中性鹽顯著影響球狀蛋白質(zhì)溶解度的現(xiàn)象，其中，增加蛋白質(zhì)溶解度的現(xiàn)象稱鹽溶，反之為鹽析。
應(yīng)當指出，同樣濃度的二價離子中性鹽，如MgCl2、（NH4）2SO4對蛋白質(zhì)溶解度影響的效果，要比一價離子中性鹽如NaCl、NH4Cl大得多。在葡萄籽蛋白提取工藝中除了可以利用堿溶法還可以利用鹽溶法來提取蛋白質(zhì)，其最佳提取工藝是：以10%NaCl溶液，按1∶25的料液比，在30℃攪拌提取30min，蛋白質(zhì)提取率為57·25%[10]。
鹽析是提取血液中免疫球蛋白的常用方法，如多聚磷酸鈉絮凝法、硫酸銨鹽析法，其中硫酸銨鹽析法廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)。由于硫酸銨在水中呈酸性，為防止其對蛋白質(zhì)的破壞，應(yīng)用氨水調(diào)pH值至中性。
為防止不同分子之間產(chǎn)生共沉淀現(xiàn)象，蛋白質(zhì)樣品的含量一般控制在0·2% ~2·0%。利用鹽溶和鹽析對蛋白質(zhì)進行提純后，通常要使用透析或者凝膠過濾的方法除去中性鹽[13]。
有機溶劑提取法的原理是：與水互溶的有機溶劑（如甲醇、乙醇）能使一些蛋白質(zhì)在水中的溶解度顯著降低；而且在一定溫度、pH值和離子強度下，引起蛋白質(zhì)沉淀的有機溶劑的濃度不同，因此，控制有機溶劑的濃度可以分離。
5.簡述現(xiàn)代分離提取方法有哪些,并且比較其優(yōu)缺點及應(yīng)用
1、超高壓提取法屬于非加熱處理加工法，可以克服傳統(tǒng)的加熱處理方法提取出的活性物質(zhì)活性低下的缺點。
優(yōu)點：壓力迅速、均勻作用到要提取的素材，可以開發(fā)出與熱處理方式不同物性的成分，具有與熱處理同樣高的提取效率。
缺點：設(shè)備投資高昂，難以分解殘留的農(nóng)藥，不同素材的壓強研究進展緩慢。
2、超聲波提取法是利用多種不同的超聲波，引起分子振動的技術(shù)。相比傳統(tǒng)的熱水提取法，超聲波提取法不會造成有效成分的破壞、損失較少，同時，通過Cabitation過程可以穩(wěn)定地提取有效成分。
優(yōu)點：反應(yīng)速度非?？?，破壞植物組織很容易，可短期內(nèi)提取出所需物質(zhì)最大限度維持活性物質(zhì)的功效，沒有殘留物。
缺點：只有對物理上穩(wěn)定的素材才適用，活性物質(zhì)容易被破壞，需要大量提取時效率低下。
分離提取的應(yīng)用：
一，料液各組分的沸點相近，甚至形成共沸物，為精餾所不易奏效的場合，如石油餾分中烷烴與芳烴的分離，煤焦油的脫酚；
二，低濃度高沸組分的分離，用精餾能耗很大，如稀醋酸的脫水；
三，多種離子的分離，如礦物浸取液的分離和凈制，若加入化學(xué)品作分部沉淀，不但分離質(zhì)量差，又有過濾操作，損耗也大；
四，不穩(wěn)定物質(zhì)（如熱敏性物質(zhì)）的分離，如從發(fā)酵液制取青霉素。
擴展資料：
分離提取也叫萃取。
分離提取的原理：
利用物質(zhì)在兩種互不相溶（或微溶）的溶劑中溶解度或分配系數(shù)的不同，使物質(zhì)從一種溶劑內(nèi)轉(zhuǎn)移到另外一種溶劑中。經(jīng)過反復(fù)多次萃取，將絕大部分的化合物提取出來。
溶劑萃取工藝過程一般由萃取、洗滌和反萃取組成。一般將有機相提取水相中溶質(zhì)的過程稱為萃?。╡xtraction），水相去除負載有機相中其他溶質(zhì)或者包含物的過程稱為洗滌（scrubbing），水相解析有機相中溶質(zhì)的過程稱為反萃取（stripping）。
分配定律是萃取方法理論的主要依據(jù)，物質(zhì)對不同的溶劑有著不同的溶解度。同時，在兩種互不相溶的溶劑中，加入某種可溶性的物質(zhì)時，它能分別溶解于兩種溶劑中。
實驗證明，在一定溫度下，該化合物與此兩種溶劑不發(fā)生分解、電解、締合和溶劑化等作用時，此化合物在兩液層中之比是一個定值。不論所加物質(zhì)的量是多少，都是如此。
參考資料：百度百科：萃取
6.膜分離技術(shù)有哪些優(yōu)點及不足
膜分離技術(shù)的優(yōu)點：1、在常溫下進行：有效成分損失極少，特別適用于熱敏性物質(zhì)，如抗生素等醫(yī)藥、果汁、酶、蛋白的分離與濃縮；2、無相態(tài)變化：保持原有的風(fēng)味，能耗極低，其費用約為蒸發(fā)濃縮或冷凍濃縮的1/3-1/8;3、無化學(xué)變化：典型的物理分離過程，不用化學(xué)試劑和添加劑，產(chǎn)品不受污染；4、選擇性好：可在分子級內(nèi)進行物質(zhì)分離，具有普遍濾材無法取代的卓越性能；5、適應(yīng)性強：處理規(guī)?？纱罂尚?，可以連續(xù)也可以間隙進行，工藝簡單，操作方便，易于自動化；6、能耗低：只需電能驅(qū)動，能耗極低，其費用約為蒸發(fā)濃縮或冷凍濃縮的1/3-1/8。
缺點：1、膜技術(shù)雖然濃縮成本低，但不能將產(chǎn)品濃縮成干物質(zhì)；2、膜技術(shù)雖然具有選擇過濾性，但是同分異構(gòu)體就無法實現(xiàn)分離。膜分離技術(shù)，是指在分子水平上不同粒徑分子的混合物在通過半透膜時，實現(xiàn)選擇性分離的技術(shù)。
由于兼有分離、濃縮、純化和精制的功能，又有高效、節(jié)能、環(huán)保、分子級過濾及過濾過程簡單、易于控制等特征，因此，已廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、生物、環(huán)保、化工、冶金、能源、石油、水處理、電子、仿生等領(lǐng)域，產(chǎn)生了巨大的經(jīng)濟效益和社會效益，已成為當今分離科學(xué)中最重要的手段之一。應(yīng)用領(lǐng)域：1、微濾具體涉及領(lǐng)域主要有：醫(yī)藥工業(yè)、食品工業(yè)（明膠、葡萄酒、白酒、果汁、牛奶等）、高純水、城市污水、工業(yè)廢水、飲用水、生物技術(shù)、生物發(fā)酵等。
2、超濾早期的工業(yè)超濾應(yīng)用于廢水和污水處理。三十多年來，隨著超濾技術(shù)的發(fā)展，如今超濾技術(shù)已經(jīng)涉及食品加工、飲料工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)、生物制劑、中藥制劑、臨床醫(yī)學(xué)、印染廢水、食品工業(yè)廢水處理、資源回收、環(huán)境工程等眾多領(lǐng)域。
3、納濾納濾的主要應(yīng)用領(lǐng)域涉及：食品工業(yè)、植物深加工、飲料工業(yè)、農(nóng)產(chǎn)品深加工、生物醫(yī)藥、生物發(fā)酵、精細化工、環(huán)保工業(yè)等。4、反滲透由于反滲透分離技術(shù)的先進、高效和節(jié)能的特點，在國民經(jīng)濟各個部門都得到了廣泛的應(yīng)用，主要應(yīng)用于水處理和熱敏感性物質(zhì)的濃縮，主要應(yīng)用領(lǐng)域包括以下：食品工業(yè)、牛奶工業(yè)、飲料工業(yè)、植物（農(nóng)產(chǎn)品）深加工、生物醫(yī)藥、生物發(fā)酵、制備飲用水、純水、超純水、海水、苦咸水淡化、電力、電子、半導(dǎo)體工業(yè)用水、醫(yī)藥行業(yè)工藝用水、制劑用水、注射用水、無菌無熱源純水、食品飲料工業(yè)、化工及其它工業(yè)的工藝用水、鍋爐用水、洗滌用水及冷卻用水。
5、其他除了以上四種常用的膜分離過程，另外還有滲析、控制釋放、膜傳感器、膜法氣體分離、液膜分離法等。
7.蛋白質(zhì)的分離方法有哪些
（一）水溶液提取法 稀鹽和緩沖系統(tǒng)的水溶液對蛋白質(zhì)穩(wěn)定性好、溶解度大、是提取蛋白質(zhì)最常用的溶劑，通常用量是原材料體積的1-5倍，提取時需要均勻的攪拌，以利于蛋白質(zhì)的溶解。
提取的溫度要視有效成份性質(zhì)而定。一方面，多數(shù)蛋白質(zhì)的溶解度隨著溫度的升高而增大，因此，溫度高利于溶解，縮短提取時間。
但另一方面，溫度升高會使蛋白質(zhì)變性失活，因此，基于這一點考慮提取蛋白質(zhì)和酶時一般采用低溫（5度以下）操作。為了避免蛋白質(zhì)提以過程中的降解，可加入蛋白水解酶抑制劑（如二異丙基氟磷酸，碘乙酸等）。
下面著重討論提取液的pH值和鹽濃度的選擇。1、pH值 蛋白質(zhì)，酶是具有等電點的兩性電解質(zhì)，提取液的pH值應(yīng)選擇在偏離等電點兩側(cè)的pH 范圍內(nèi)。
用稀酸或稀堿提取時，應(yīng)防止過酸或過堿而引起蛋白質(zhì)可解離基團發(fā)生變化，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)構(gòu)象的不可逆變化，一般來說，堿性蛋白質(zhì)用偏酸性的提取液提取，而酸性蛋白質(zhì)用偏堿性的提取液。2、鹽濃度 稀濃度可促進蛋白質(zhì)的溶，稱為鹽溶作用。
同時稀鹽溶液因鹽離子與蛋白質(zhì)部分結(jié)合，具有保護蛋白質(zhì)不易變性的優(yōu)點，因此在提取液中加入少量NaCl等中性鹽，一般以0.15摩爾。升濃度為宜。
緩沖液常采用0.02-0.05M磷酸鹽和碳酸鹽等滲鹽溶液。（二）有機溶劑提取法 一些和脂質(zhì)結(jié)合比較牢固或分子中非極性側(cè)鏈較多的蛋白質(zhì)和酶，不溶于水、稀鹽溶液、稀酸或稀堿中，可用乙醇、丙酮和丁醇等有機溶劑，它們具的一定的親水性，還有較強的親脂性、是理想的提脂蛋白的提取液。
但必須在低溫下操作。丁醇提取法對提取一些與脂質(zhì)結(jié)合緊密的蛋白質(zhì)和酶特別優(yōu)越，一是因為丁醇親脂性強，特別是溶解磷脂的能力強；二是丁醇兼具親水性，在溶解度范圍內(nèi)（度為10%,40度為6.6%）不會引起酶的變性失活。
另外，丁醇提取法的pH及溫度選擇范圍較廣，也適用于動植物及微生物材料。二、蛋白質(zhì)的分離純化 蛋白質(zhì)的分離純化方法很多，主要有：（一）根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度不同的分離方法1、蛋白質(zhì)的鹽析 中性鹽對蛋白質(zhì)的溶解度有顯著影響，一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高，蛋白質(zhì)的溶解度增加，此稱鹽溶；當鹽濃度繼續(xù)升高時，蛋白質(zhì)的溶解度不同程度下降并先后析出，這種現(xiàn)象稱鹽析，將大量鹽加到蛋白質(zhì)溶液中，高濃度的鹽離子（如硫酸銨的SO4和NH4）有很強的水化力，可奪取蛋白質(zhì)分子的水化層，使之“失水”，于是蛋白質(zhì)膠粒凝結(jié)并沉淀析出。
鹽析時若溶液pH在蛋白質(zhì)等電點則效果更好。由于各種蛋白質(zhì)分子顆粒大小、親水程度不同，故鹽析所需的鹽濃度也不一樣，因此調(diào)節(jié)混合蛋白質(zhì)溶液中的中性鹽濃度可使各種蛋白質(zhì)分段沉淀。
影響鹽析的因素有：（1）溫度：除對溫度敏感的蛋白質(zhì)在低溫（4度）操作外，一般可在室溫中進行。一般溫度低蛋白質(zhì)溶介度降低。
但有的蛋白質(zhì)（如血紅蛋白、肌紅蛋白、清蛋白）在較高的溫度（25度）比0度時溶解度低，更容易鹽析。（2）pH值：大多數(shù)蛋白質(zhì)在等電點時在濃鹽溶液中的溶介度最低。
（3）蛋白質(zhì)濃度：蛋白質(zhì)濃度高時，欲分離的蛋白質(zhì)常常夾雜著其他蛋白質(zhì)地一起沉淀出來（共沉現(xiàn)象）。因此在鹽析前血清要加等量生理鹽水稀釋，使蛋白質(zhì)含量在2.5-3.0%。
蛋白質(zhì)鹽析常用的中性鹽，主要有硫酸銨、硫酸鎂、硫酸鈉、氯化鈉、磷酸鈉等。 其中應(yīng)用最多的硫酸銨，它的優(yōu)點是溫度系數(shù)小而溶解度大（25度時飽和溶液為4.1M，即767克/升；0度時飽和溶解度為3.9M，即676克/升），在這一溶解度范圍內(nèi)，許多蛋白質(zhì)和酶都可以鹽析出來；另外硫酸銨分段鹽析效果也比其他鹽好，不易引起蛋白質(zhì)變性。
硫酸銨溶液的pH常在4.5-5.5之間，當用其他pH值進行鹽析時，需用硫酸或氨水調(diào)節(jié)。 蛋白質(zhì)在用鹽析沉淀分離后，需要將蛋白質(zhì)中的鹽除去，常用的辦法是透析，即把蛋白質(zhì)溶液裝入秀析袋內(nèi)（常用的是玻璃紙），用緩沖液進行透析，并不斷的更換緩沖液，因透析所需時間較長，所以最好在低溫中進行。
此外也可用葡萄糖凝膠G-25或G-50過柱的辦法除鹽，所用的時間就比較短。2、等電點沉淀法 蛋白質(zhì)在靜電狀態(tài)時顆粒之間的靜電斥力最小，因而溶解度也最小，各種蛋白質(zhì)的等電點有差別，可利用調(diào)節(jié)溶液的pH達到某一蛋白質(zhì)的等電點使之沉淀，但此法很少單獨使用，可與鹽析法結(jié)合用。
3、低溫有機溶劑沉淀法 用與水可混溶的有機溶劑，甲醇，乙醇或丙酮，可使多數(shù)蛋白質(zhì)溶解度降低并析出，此法分辨力比鹽析高，但蛋白質(zhì)較易變性，應(yīng)在低溫下進行。（二）根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小的差別的分離方法1、透析與超濾 透析法是利用半透膜將分子大小不同的蛋白質(zhì)分開。
超濾法是利用高壓力或離心力，強使水和其他小的溶質(zhì)分子通過半透膜，而蛋白質(zhì)留在膜上，可選擇不同孔徑的瀘膜截留不同分子量的蛋白質(zhì)。2、凝膠過濾法 也稱分子排阻層析或分子篩層析，這是根據(jù)分子大小分離蛋白質(zhì)混合物最有效的方法之一。
柱中最常用的填充材料是葡萄糖凝膠（Sephadex ged）和瓊脂糖凝膠（agarose gel）。（三）根據(jù)蛋白質(zhì)帶電性質(zhì)進行分離 蛋白質(zhì)在不同pH環(huán)境中帶電性質(zhì)和電荷數(shù)量不同，可將其分開。
1、電泳法 各種蛋白質(zhì)在同。
